rpa(recombinase polymerase amplification)是一种等温性扩增技术，不需要复杂的设备和高温退火程序。rpa试剂盒中含有dna引物、解旋酶、聚合酶、寡核苷酸等多种试剂，并且可以特异性地扩增目标dna片段，同时还可以进行多样本检测。在rpa过程中，首先由引物和解旋酶使dna双链断裂，然后dna单链与引物特异性结合，并启动dna聚合酶进行扩增反应，扩增产物可以通过电泳、实时荧光和拉曼光谱等方法进行检测和定量。rpa广泛应用于基因诊断、病原体检测、食品安全和环境监测等领域。
rpa试剂盒的主要组成部分是酶和试剂，其中酶对温度比较敏感，所以rpa试剂盒通常不耐高温。高温可导致酶的变性和活性损失，影响试剂盒的性能。
rpa试剂盒不耐高温的主要原因
1. 核酸聚合酶
rpa试剂盒中的核酸聚合酶对温度敏感，高温可导致其构象改变，失去活性，无法正常复制dna模板。
2. 重组酶recombinase
rpa试剂盒中的重组酶也对温度比较敏感，高温可破坏其二级结构和三级结构，失去识别dna和催化重组的能力。
3. 单链rna素
rpa试剂盒中的单链rna素结构简单，但也对温度敏感，高温可破坏其结构，失去与核酸的特异性结合能力。
4. dntp等
rpa试剂盒中的dntp和其他试剂在高温下也更易降解，影响实验结果。
5. 酶的协同作用：
rpa试剂盒中多种酶之间需要协同作用实现dna的複制和扩增，高温可干扰各酶间的作用，破坏其间的协同效应。